产品货号:
GL2813
中文名称:
植物基因组DNA提取试剂盒(CTAB粗提法)
英文名称:
产品规格:
50T|100T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本试剂盒是简单快速简便的提取植物总DNA的试剂盒,先将新鲜植物样本研磨破碎细胞壁,加入CTAB抽提液使细胞膜破裂同时将核酸与植物多糖等杂质分开,CTAB抽提液的有效成分为CTAB(十六烷基三乙基溴化铵),经蛋白清除液等去除蛋白,即可获得植物基因组DNA,可进行酶切、PCR等下游实验。该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
从植物组织中制备基因组DNA较常采用的方法有氯化离心法、CTAB抽提法等。CTAB抽提法是经典迅速的植物DNA提取法,可以用于多种不同类型植物样品DNA的提取,获得的量很高,但是纯度一般,但是足够用于大多数分子生物学实验。
组分 | 50T | 100T |
CTAB抽提液 | 250mL | 500mL |
2-ME | 5mL | 10mL |
DNA沉淀液 | 250mL | 500mL |
DNA洗涤液 | 250mL | 500mL |
TE Buffer | 10mL | 20mL |
保存:室温,避光,有效期1年。
- 液氮\研钵或匀浆器、离心管、恒温箱或水浴锅、离心机
- 氯仿异戊醇(24:1)
- 如果每次的使用量很小,可以适当分装后再使用。
- 用于裂解植物组织或叶片越新鲜,裂解越好、收获量越大。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 取5mL或适量的CTAB抽提液,按CTAB抽提液∶2-ME=50∶1的比例混匀,置于15mL或其他规格的离心管中,60℃预热。
- 称取1.0~1.5g或适量新鲜植物组织或叶片,用预冷的液氮或干冰冷却研钵或匀浆器,将新鲜植物组织或叶片粉碎成细粉末,将冷冻的组织转移至离心管中。
- 向粉碎后的组织中加入预热的CTAB抽提液,充分混匀,65℃温育30~60min,并不时混匀。
- 加入等体积氯仿异戊醇(24:1),轻轻颠倒混匀,8000g离心8min,回收上层水相(即上清液,该上清液中含有所需DNA)。
- 转移上清液至新的离心管中,加入1/2~2/3体积预冷的DNA沉淀液,轻轻混匀,室温静置使核酸沉至管底。如果观察不到沉淀,可在室温下静置数小时至过夜。
- 2000g离心2min,轻轻弃上清液。
- 在松散的DNA沉淀物上加入DNA洗涤液(如果使用1.5mL离心管,加入1mL洗涤液,如果15mL离心管,加入8~10mL洗涤液),室温静置20min,4000g离心10min,轻轻弃上清液。
- 自然干燥DNA,加入10~20μL TE Buffer,-20℃保存。
- TE buffer体积越大,DNA浓度越低。
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